负鼠科Didelphidae，是有袋类的最大也是分布最广泛的一科，包括美洲有袋类的绝大多数种类，共约有67种，分布几乎遍及拉丁美洲各地。其中一种即北美负鼠Didelphis virginiana进入了北美洲，最北达到了加拿大南部，是现存分布最北的有袋类。
负鼠科虽然属于有袋类，但是只有3个属的成员有清晰的育儿袋，其他种类则无袋囊或只有简单的皮褶。负鼠的习性比较多样，有些种类为地栖，有些种类为树栖，还有一种即水负鼠学名Chironectes minima为半水栖性，大型的种类大小似猫，小型种类大小似鼠，其中多数种类特别是树栖的类型有可以缠绕的尾巴。
负鼠多为杂食性，但也有只食肉和食虫的种类。负鼠寿命短，繁殖率高，是拉丁美洲森林种数量最多的哺乳动物之一，但多夜间活动且善于隐蔽而不易见到。
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